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  • 中国海洋药物
  • 2022年 第41卷 第4期
  • 出刊日期：2022-08-30
《中国海洋药物》杂志创刊于1982年，是由中国科协主管、中国药学会主办、中国海洋大学医药学院《中国海洋药物》杂志编辑部编辑出版，国内外公开发行的中国科技核心期刊（双月刊）。 本刊是国际上首个海洋药物专业的学术期刊，自创刊以来始终坚持办刊宗旨，致力于海洋药物的研究和开发，系统地报道有关海洋药物及相关学科的研究成果和国内外最新动态，积极推动海洋药学事业与其他学科的交流和发展。

2022年第41卷第4期

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      研究报告
    • 基因组信息指导下海参共附生Penicillium sclerotiorum SD-36嗜氮酮类化合物的挖掘
      王红,殷欣,孟庆洲,曲昆玉,刘海溶,吴清华,杨梦,赵丽娅,戴美学,夏雪奎
      目的 结合生物信息学与分子遗传操作技术深入挖掘海参共附生菌核青霉(Penicillium sclerotiorum)SD-36的活性次级代谢产物,并探析其生物合成基因簇中转录调控因子的作用。方法 基于本课题组前期P. sclerotiorum SD-36的基因组信息,利用antiSMASH预测了一条具有合成嗜氮酮类化合物潜力的双PKS基因簇。针对该簇中一个锌指转录因子PsAza1构建了含潮霉素抗性基因和强启动子pgpdA的转录因子基因过表达盒,转化P. sclerotiorum SD-36原生质体后,经过抗性筛选及PCR验证获得阳性转化子OE::PsAza1。发酵培养后HPLC检测次级代谢产物变化并通过qRT-PCR验证基因簇核心基因的转录水平。结果 OE::PsAza1的多种次级代谢产物产量增加,其中两个化合物通过质谱、核磁数据鉴定为活性嗜氮酮类isochromophilone VI和sclerotiorin C,其产量较野生型分别增加了约6倍和4.5倍。qRT-PCR检测该簇中两个聚酮合酶基因及Psaza1基因的转录水平,显示上调60-80倍。结论 首次明确P. sclerotiorum SD-36的双PKS基因簇编码活性嗜氮酮类化合物,且转录因子PsAza1正向调控该簇核心基因的表达水平及化合物产量。本研究结果为P. sclerotiorum SD-36中化合物isochromophilone VI和sclerotiorin C的生物制备及调控研究奠定理论基础。
      2022  Vol.  41(4):    1-11    [摘要](221)    [PDF](2)
    • 冷泉来源诺卡氏菌OUCLQ19-35-1次级代谢产物的研究
      郭艺伟,张翼,李花月,肖菲,李文利
      目的 探究深海冷泉来源微生物的次级代谢产物产生能力,从中挖掘具有抗多重耐药(multi-drug resistant, MDR)菌活性的次级代谢产物,为新药研发提供化合物实体。方法 采用稀释涂布法分离纯化深海冷泉海泥样品中的放线菌,通过琼脂扩散法筛选具有抗MDR菌活性的放线菌；基于16S rRNA基因片段序列分析和系统进化树构建初步确定目标放线菌种属；对目标放线菌进行大规模发酵,采用有机溶剂萃取、反相硅胶柱层析、半制备高效液相等分离手段对发酵产物进行分离纯化,利用NMR、MS等波谱学技术并结合文献对化合物进行结构鉴定,然后对化合物进行抗MDR菌活性测试。结果 从深海冷泉中筛选到一株具有抗MDR菌Micrococcus luteus ML01和Staphylococcus aureus CCARM3090活性的放线菌OUCLQ19-35-1,16S rRNA序列及系统进化树分析初步确定其为Nocardiopsis synnemataformans；从其发酵产物中分离得到3个化合物,分别为questiomycin A(1)、1,6-dihydroxyphenazine(2)和5a,6,11a,12-tetrahydro-5a,11a-dimethyl[1,4]benzoxazino[3,2-b][1,4]benzoxazine(3)；活性结果显示,化合物1-3均无抗MDR菌活性,但其所在的组分有抑菌活性。结论 从深海冷泉筛选得到一株诺卡氏菌OUCLQ19-35-1,其能够产生抗MDR菌的活性次级代谢产物,具有潜在的应用价值,但其活性成分待进一步的确定。
      2022  Vol.  41(4):    12-18    [摘要](180)    [PDF](2)
    • 两株软珊瑚共附生曲霉属真菌EGF7-0-1和EGF15-0-3共培养中杂萜类成分研究
      蔡金旋,冯冉奇,韦霞,司徒美霞,王纪元,张翠仙
      目的 从混合培养的海洋软珊瑚共附生真菌中获得具新颖结构、良好活性的杂萜类成分进行研究。方法 采用大米培养基对两株软珊瑚共附生曲霉属真菌EGF7-0-1和EGF15-0-3进行共培养；根据杂萜类化合物的结构特征,在GNPS和TLC的共同指导下,运用多种柱色谱及HPLC等方法对其杂萜类成分进行目标导向分离；通过NMR、(HR)MS和ORD等技术及物理常数对照等手段对单体化合物进行结构鉴定；采用LC-MSn和GNPS技术分析比较获得的杂萜类成分在两株真菌共培养及EGF7-0-1单培养中的含量。结果 从两株海洋真菌Aspergillus sp. EGF7-0-1和EGF15-0-3共培养的大米培养基中共分离得到7个杂萜类化合物,结构分别为terretonin (1)、terretonin A (2)、terretonin D1 (3)、terretonin H (4)、terrentoxin E (5)、aperterpene N (6)和asperterpene J (7)。LC-MSn和GNPS分析结果表明共培养条件下杂萜类化合物更为丰富。结论 化合物1-7均为具6/6/6骈并骨架的DMOA(即3,5-二甲基苔色酸)途径衍生而成的杂萜。与菌株EGF7-0-1单培养相比,两株真菌共培养可以诱导产生丰富的杂萜,为进一步新颖杂萜类化合物的挖掘提供支持数据。
      2022  Vol.  41(4):    19-26    [摘要](174)    [PDF](1)
    • 芋螺毒素Tx3h的合成鉴定和活性的研究
      鞠双,颜清慧,刘思懿,张雨,罗素兰,符影
      目的 芋螺毒素是一类结构多样、数量庞大的海洋药源宝库。研究前期从织锦芋螺毒液中发现的芋螺毒素Tx3h，它的的结构和功能未见报道。方法 通过固相多肽合成法（SPPS）人工合成了Tx3h的线性肽，采用一步氧化法对线性肽进行氧化折叠，获得了Tx3h的两个二硫键连接不同的折叠肽异构体（Tx3h-a和Tx3h-b），并对其氧化折叠条件进行了优化。通过部分还原及烷基化反应，结合MALDI-TOF-MS/MS分析，鉴定了Tx3h-a和Tx3h-b的二硫键连接方式。采用双电极电压膜片钳技术测试了Tx3h-a和Tx3h-b对α4β2和α3β2 nAChRs的抑制作用。结果 通过氧化折叠条件的优化，Tx3h-a和Tx3h-b的产率分别从7.5 %和9.3 %提高到23.7 %和22.4 %。Tx3h-a和Tx3h-b的二硫键连接方式分别鉴定为I-V, II-VI, III-IV和I-VI, II-IV, III-V。在10 μmol/L终浓度下，Tx3h-a和Tx3h-b对α4β2 nAChR的阻断率分别为(35.06 ± 4.90) %和(34.85 ± 3.02) %，对α3β2 nAChR无阻断作用。结论 通过对芋螺毒素Tx3h折叠肽的合成、二硫键连接鉴定以及乙酰胆碱受体活性检测，发现二硫键连接为I-V, II-VI, III-IV和I-VI, II-IV, III-V的Tx3h折叠肽对α4β2 nAChR有更好的选择性，为其后续研究开发奠定了基础。
      2022  Vol.  41(4):    27-35    [摘要](158)    [PDF](1)
    • 褐藻胶对Wilson病小鼠的神经保护作用机制研究
      南宝,周缜,汪贯习,葛科立,王发合,邱霞,郭云良
      目的：探讨褐藻胶对Wilson’s病（WD）小鼠基底节豆状核变性的神经保护作用和机制。方法：健康雄性昆明小鼠，应用铜负荷饮食法建立HLD模型。治疗组每天给予褐藻胶灌胃，对照组动物同步给予等体积的生理盐水灌胃，每日1次，连续28天周。电感耦合等离子体质谱法检测尿铜水平，血液分析仪计数血常规指标，生化分析仪检测肝肾功指标（ALT、AST、Urea、Crea），甲苯胺蓝染色法观察豆状核神经细胞的病理变化，TUNEL法检测细胞凋亡，免疫组化法检测核转录因子-κB（NF-κB）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达。结果：经褐藻胶干预后，高剂量组小鼠行为功能较模型组显著改善，尿铜水平较模型组显著降低（P<0.05），血清ALT、AST活性较模型组均显著下降（P<0.05），变性细胞指数和凋亡细胞指数较模型组均显著降低（P<0.05），NF-κB和MMP-9表达水平较模型组均显著减弱（P<0.05）。结论：褐藻胶可能通过促进铜离子的排泄，抑制铜离子引起的氧化应激和炎症反应，对基底节豆状核神经细胞发挥保护作用。
      2022  Vol.  41(4):    36-44    [摘要](175)    [PDF](1)
    • 藻酸盐医用敷料促小鼠皮肤创面愈合的研究
      陈柳青，周晓丹，王汉虎，许可
      摘要：目的 探索藻酸盐医用敷料对小鼠全层皮肤切除后的促愈合效果及凋亡信号的影响。方法 建立小鼠创面模型，分为对照组和藻酸盐医用敷料组。分别于不同时间段观察创面愈合情况，HE染色及Masson染色观察肉芽形成及胶原沉积情况，Ki67染色观察创面组织增殖情况，Western blot和免疫荧光染色检测凋亡信号通路表达情况。结果 与对照组相比，藻酸盐医用敷料组加速创面愈合，促进伤口肉芽组织形成和胶原的沉积，促进伤口细胞增殖。此外与对照组，藻酸盐医用敷料组促进Bcl-2表达，抑制caspase3表达。结论 藻酸盐医用敷料通过调控凋亡信号通路促进小鼠创面愈合。
      2022  Vol.  41(4):    45-50    [摘要](162)    [PDF](1)
    • 芍药苷对大鼠低氧性肺动脉高压的防治作用及其抗氧化机制研究
      王贞丽,姜萍,李丙华,季滨龙
      目的 研究芍药苷对低氧诱导的肺动脉高压大鼠模型的作用并初步探讨其作用机制。方法 60只SD大鼠随机分为6组，每组10只，分别为：对照组（等体积生理盐水，ig）、模型组（等体积生理盐水，ig）、阳性对照组（西地那非25 mg/kg，ig）、芍药苷低、中、高剂量组（20、40、80 mg/kg，ig）。对照组大鼠置于正常环境中饲养，其余各组均于给药0.5 h后置于全自动低压低氧舱内（大气压50 kPa，氧浓度10%），每天8 h，持续21 d。在实验终点时检测各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）、平均颈动脉压（mCAP）、右心室肥厚指数（RVHI）及观察肺动脉病理变化；检测血浆内皮素（ET-1）、血清一氧化氮（NO）水平；检测肺组织匀浆超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、丙二醛（MDA）含量。结果 与对照组比较，模型组大鼠mPAP、RVHI、血浆ET-1水平、肺组织中MDA含量显著升高（P＜0.01），血清中NO水平、肺组织中SOD、CAT、GSH-Px活性显著降低（P＜0.01），HE染色显示大鼠肺小动脉管壁明显增厚，管腔狭窄。与模型组比较，芍药苷中、高剂量组大鼠mPAP、RVHI、血浆ET-1水平、肺组织中MDA含量显著降低（P＜0.05或P＜0.01），血清中NO水平、肺组织中SOD、CAT、GSH-Px活性显著升高（P＜0.05或P＜0.01）；HE染色显示不同剂量芍药苷干预后，大鼠肺小动脉管壁增厚和管腔狭窄均不同程度减轻。结论 芍药苷可降低低氧诱导的大鼠肺动脉高压与右心室肥厚程度，减轻肺小动脉血管重塑，其机制可能与降低大鼠血浆ET-1水平、升高血清NO水平，改善血管内皮舒缩因子失衡，提高大鼠肺组织匀浆中SOD、CAT、GSH-Px活性、降低MDA含量，减轻大鼠肺组织氧化应激损伤有关。
      2022  Vol.  41(4):    51-58    [摘要](168)    [PDF](1)
    • 中药甲香基原品种古今考
      陈玉燕,黄泽豪
      甲香是我国香药中重要的品种，其作为药物使用是始载于梁代的《名医别录》，罕用于医方中，大多用于合香。该文对中药甲香基原古今品种进行考证，结果表明古代本草中收载的甲香来源于娥螺科动物香螺（Neptunea cumingi Crosse），而现代本草记载的甲香药材来源于蝾螺科动物蝾螺（Turbo cornutus Solander）及其近亲缘动物的厣，实则是本草记载的郎君子。该结果可为充分认识甲香的基原物种提供新的佐证。
      2022  Vol.  41(4):    59-66    [摘要](147)    [PDF](1)
    • 盐析辅助分散液液微萃取毛细管电泳测定口服液中甜味剂和防腐剂
      王益超,薛琦,姜廷福,吕志华
      目的 采用盐析辅助分散液液微萃取(SADLLME)-大体积样品堆积(LVSS)-毛细管电泳(CE)法测定阿斯巴甜、糖精、安赛蜜三种甜味剂以及苯甲酸、山梨酸两种防腐剂。方法 将待测溶液进行盐析液液微萃取处理后进行CE分析测定,设定电泳条件为：进样压力50 mbar,进样时间为 120 s,正常极性下分离电压为 20 kv,检测波长为 214 nm,分离温度为 25 °C。 结果 该方法在0.05~1.00 μg/mL范围内线性关系良好,最低检测限为2.5 ng/mL~10 ng/mL。萃取重现性良好(RSD小于10 ％,n=5)。待测组分富集倍数达到657~1674,富集效果良好。把该方法应用于不同种类口服液进行食品添加剂含量的测定,均获得了满意的结果。结论 实验表明使用微萃取与在线富集结合的手段更为高效、快速,能获得更高的富集倍数,成为提高毛细管电泳灵敏度的一种可靠方法。
      2022  Vol.  41(4):    67-72    [摘要](316)    [PDF](37)
    • 壳三糖在大鼠体内的组织分布和排泄研究
      张朋朋,于明明,吕志华
      目的 研究壳三糖在大鼠体内的组织分布及排泄。方法 建立并验证了大鼠组织、尿液和粪便中壳三糖的高效液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）检测方法。大鼠灌胃给药壳三糖35 mg/kg后，分别在0.5、1.5、3 h 摘取组织，0 h - 4 h、4 h - 8 h、8 h - 12 h、12 h - 24 h 、24 h - 36 h、36 – 48 h时间段收集尿液和粪便。用建立的LC-MS/MS方法测定组织、尿液和粪便中的壳三糖含量。结果 组织、尿液和粪便中壳三糖在10 - 10000 ng/mL的浓度范围内线性良好，日内、日间精密度的相对标准偏差（relative standard deviation，RSD ）≤14.20%，准确度的相对误差（relative error，RE）为?11.30%～8.33%，提取回收率为85.2% - 97.9%，没有明显的基质效应，在室温放置24 h、反复冻融以及-40℃放置30天的条件下稳定性良好，满足生物样品的检测需求。灌胃给药后，0.5 h就可以在主要组织检测到壳三糖，1.5 h肾脏中壳三糖含量明显升高，3 h未在大脑中检测到壳三糖。48 h后壳三糖在尿液、粪便中的排泄率分别为7.15%、72.80%。结论 壳三糖主要以原型的形式在大鼠体内分布和排泄，壳三糖在大鼠各组织中的分布较为广泛，以肝和肾为主，粪便是壳三糖的主要排泄途径。
      2022  Vol.  41(4):    73-79    [摘要](144)    [PDF](1)
      • 综述
    • 海星皂苷生物活性与制备研究进展
      刘光椿,原丽红
      海洋是全球药物研发的重要宝库，提高海洋生物资源深度开发和高值化利用能力，是我国海洋强国战略的重要组成部分，也是促进海洋经济可持续发展及实施“蓝色药库”的关键途径之一。海星属典型的棘皮动物，进化地位和生物学特征独特，是国际公认的药用/保健用海洋生物。海星中含有皂苷、多糖、多肽、氨基酸、胶原蛋白、甾醇及生物碱等多种营养成分和活性物质，其中海星皂苷在抗肿瘤、抗炎、抗衰老及降血脂等方面展现出良好的生物活性，在食品和药物研发领域具有巨大的发展潜力和广阔的应用前景。本文系统检索了近30年海星皂苷的研发现况，并且对近15年来海星皂苷的生物活性、提取分离及相关专利等方面取得的研究进展进行梳理，进而为其在营养保健和药物研发中的应用提供相关理论支持。
      2022  Vol.  41(4):    80-88    [摘要](161)    [PDF](1)
    • 虾青素临床研究现状及其在特医食品开发中的应用前景
      胡艺琪,史瑞雅,陈佳音,张敏,郭敏,樊竑冶,吴洁
      虾青素是一种酮式类胡萝卜素，具有广泛的临床应用价值，在糖尿病、心血管系统疾病、眼科疾病、神经疾病及肿瘤的预防和治疗等多方面体现一定的改善作用。特殊医学用途配方食品（特医食品）是为了满足特定疾病状态人群对营养素或膳食的特殊需要，专门加工配制而成的配方食品，能辅助临床治疗。本文对虾青素的临床及临床前研究进行综述，为未来基于虾青素的特医食品开发及进一步深入研究提供参考。
      2022  Vol.  41(4):    89-94    [摘要](151)    [PDF](1)

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