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  • 中国海洋药物
  • 2022年 第41卷 第2期
  • 出刊日期：2022-04-30
《中国海洋药物》杂志创刊于1982年，是由中国科协主管、中国药学会主办、中国海洋大学医药学院《中国海洋药物》杂志编辑部编辑出版，国内外公开发行的中国科技核心期刊（双月刊）。 本刊是国际上首个海洋药物专业的学术期刊，自创刊以来始终坚持办刊宗旨，致力于海洋药物的研究和开发，系统地报道有关海洋药物及相关学科的研究成果和国内外最新动态，积极推动海洋药学事业与其他学科的交流和发展。

2022年第41卷第2期

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      研究报告
    • 南极来源嗜/耐冷真菌的多样性及生物活性研究
      张瑶，高海，郭胜楠，李梓沐，朱伟明，王乂
      目的 研究南极来源真菌的多样性及其生物活性。方法 通过形态观察，化学筛选和序列比较，对南极来源的真菌进行排重，依据真菌ITS rDNA基因序列分析比对结果，使用MEGA 5.0软件对排重后的真菌进行鉴定和系统发育分析。采用纸片法进行抑菌活性筛选，采用MTT法进行抗肿瘤活性筛选。结果 南极来源的147株真菌经形态分析，化学排重和序列分析后获得48株代表菌株，ITS基因序列亲缘关系分析结果显示，属于子囊菌门（Ascomycota）的4个目和6个属：Penicillium、Malbranchea、Aspergillus、Cladosporium、Pseudogymnoascus、Emericellopsis。其中，所鉴定的真菌以Penicillium属为优势菌属，占58.9％，12株嗜/耐冷菌在系统发育树中的亲缘关系相近且以Pseudogymnoascus属为优势菌属。通过活性测试筛选显示耐冷真菌具有良好的抑菌和抗肿瘤活性。结论 南极来源菌株具有丰富的种群和生物活性的多样性，是天然产物活性先导化合物的重要生物资源。
      2022  Vol.  41(2):    1-6    [摘要](553)    [PDF](197)
    • 西瑁岛软珊瑚Dendronephthya sp.的化学成分和生物活性研究
      李旺盛,高天润,章海燕,郭跃伟,罗辉,刘进
      目的 对采自中国南海西瑁岛海域的软珊瑚Dendronephthya sp.的化学成分和抗炎活性研究。方法 综合利用薄层色谱、硅胶柱色谱和凝胶柱层析等分离手段,对纯化的单体成分采用核磁波谱(NMR)和质谱(MS)等方法进行鉴定,结合文献数据比对确定化合物结构；并对化合物进行了抗炎活性测试和细胞毒性实验。结果 从软珊瑚Dendronephthya sp.中共分离鉴定了11个化合物,包括6个甾体化合物,4个嘧啶类化合物及1个醇类化合物：胆固醇(1),胆固醇乙酸脂(2),胆固醇-5α,6α-环氧化物(3),鲨肝醇(4),11-acetoxy-3β,6α-dihydroxy-9,11-seco-5α-cholest-7-en-9-one(5),啤酒甾醇(6),3β,5α,6β-三羟基胆甾烷醇(7),胸腺嘧啶(8),脲嘧啶(9),胸苷(10),脲苷(11)。结论 化合物5和6是首次从该种属中分离得到,其中化合物5对脂多糖诱导的BV-2细胞的炎症反应具有抑制作用。
      2022  Vol.  41(2):    7-13    [摘要](473)    [PDF](160)
    • 海洋真菌Penicillium sp.产抗肿瘤天然产物brefeldin A的发酵优化研究
      武艳伟,张群,滕云飞,姜瑶瑶,邵长伦,魏美燕
      目的 对海洋来源真菌Penicillium sp.产抗肿瘤天然产物brefeldin A的发酵优化，以期获得高产率目标化合物。方法 运用单因素实验设计，重点考察了培养方式、发酵培养基组成 (如碳源、氮源、盐度等)以及培养条件 (温度、摇床转速)等因素。结果 最佳发酵条件为：马铃薯200 g/L，麦芽糖10 g/L，淀粉20 g/L，海盐15 g/L，28 ℃, 摇床转速160 r/min，培养14天。结论 在该发酵条件下，brefeldin A的实际产量达到40 mg/L，较优化前提高了近10倍。
      2022  Vol.  41(2):    14-18    [摘要](464)    [PDF](156)
    • 羧甲基壳聚糖复合水凝胶的制备及其性能研究
      李明,刘杨,龚浩,刘迪,任莉,蔡超,于广利
      目的 制备羧甲基壳聚糖复合水凝胶并对其粘附和抑菌等性能进行研究,为创伤敷料的开发奠定基础。方法 以羧甲基壳聚糖(CMCS)、氧化淀粉(OST)和单宁酸(TA)为原料,通过席夫碱反应制备系列水凝胶，在对其形貌、流变学、溶胀度和粘附性等性能表征基础上，进一步并对其生物相容性和抑菌活性进行评价。结果 CMCS与OST/TA溶液体积比为2:1时，制备的水凝胶COT-2凝胶化时间最短(8.3±0.9 s)，粘附强度最高(13.1 kPa)，孔径大小适中(200 μm)，有可自愈合能力，且对HaCaT细胞没有明显毒性，对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有良好的抑制作用。结论 水凝胶COT-2具有较强的粘附性、机械性能和可自愈合能力，并且表现出良好的生物相容性和抑菌活性，有开发成为是伤口敷料的潜力。
      2022  Vol.  41(2):    19-27    [摘要](365)    [PDF](171)
    • 鲟鱼软骨硫酸软骨素的制备及结构分析
      白雪,高昕,赵雪,于明晓,侯虎
      目的 采用酶解提取法，从鲟鱼软骨中提取硫酸软骨素，对其化学结构进行研究。方法 从鲟鱼软骨中提取硫酸软骨素，通过紫外-可见吸收光谱法（UV），傅里叶变换红外光谱法（FTIR），PMP柱前衍生高效液相色谱法（PMP-HPLC）、核磁共振波谱法（NMR）和液质联用分析（HPLC-MS），对硫酸软骨素的化学结构进行分析。结果 采用酶解提取法，从鲟鱼软骨中制备了硫酸软骨素。单糖分析表明，鲟鱼硫酸软骨素主要由葡萄糖醛酸（48.23%）和氨基半乳糖（46.29%）组成。结合NMR分析和HPLC-MS分析可知，从鲟鱼软骨中提取的硫酸软骨素主要含有4-单硫取代的硫酸软骨素A二糖单元，6-单硫取代的硫酸软骨素C二糖单元，其所占比例分别为34%和63%，硫酸根含量为23.22%，属于高硫酸化的硫酸软骨素。结论 从鲟鱼软骨中提取出了具有高硫酸根含量的硫酸软骨素组分，可应用于保健食品和海洋药物的开发等领域。
      2022  Vol.  41(2):    28-36    [摘要](342)    [PDF](148)
    • 兔抗条纹斑竹鲨IgNAR多克隆抗体的制备和应用
      肖国凯,郝珮羽,冯世涛,柳晓春,范益华,吕建欣,隋建新,于文功,顾玉超
      目的 制备条纹斑竹鲨IgNAR的多克隆抗体,为条纹斑竹鲨单域抗体的开发提供工具。方法 合成条纹斑竹鲨IgNAR恒定区的一段多肽作为抗原,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体血清,采用间接ELISA法测定抗体的效价,并通过Western blotting检测多克隆抗体的特异性。此外,利用制备的多克隆抗体对条纹斑竹鲨外周血淋巴细胞进行免疫荧光和流式分析。结果 制备的抗血清效价高达1000万,该多克隆抗体不仅能识别条纹斑竹鲨的IgNAR,还能识别护士鲨的IgNAR,但对条纹斑竹鲨的灵敏度更高。通过免疫荧光和流式细胞术确定了该多克隆抗体还可以识别条纹斑竹鲨外周血淋巴细胞跨膜型IgNAR。结论 成功制备了条纹斑竹鲨IgNAR的多克隆抗体,该抗体可用于Western blotting、免疫荧光和流式细胞术等实验,为条纹斑竹鲨单域抗体的开发提供了有力工具。
      2022  Vol.  41(2):    37-42    [摘要](318)    [PDF](158)
    • 蛋白激酶AMPK高效制备及活性检测方法的建立
      陈进,郭鑫鑫,李芯蕊,朱秋美,王蕊红,顾玉超
      目的 建立高效的AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）的制备方法，并建立一种基于酶联免疫吸附（ELISA）法的AMPK蛋白激酶活性检测方法以用于药物筛选。方法 利用大肠杆菌表达系统，将AMPK的α、β和γ三个亚基与钙调素依赖性蛋白激酶激酶β（CAMKK β）共表达，重组AMPK被CAMKK β磷酸化修饰并激活，进而纯化得到具有激酶活性的重组AMPK蛋白复合体。根据AMPK底物乙酰辅酶A羧化酶（ACC）的磷酸化修饰位点（Ser79）设计合成生物素标记的多肽（SAMS）作为AMPK激酶的底物。在ATP存在的情况下AMPK对生物素标记的SAMS多肽进行磷酸化修饰，反应产物转移到链霉亲和素包被的酶标板中，SAMS多肽通过链霉亲和素结合到酶标板。以能够识别SAMS磷酸化修饰的抗体作为一抗进行ELISA检测，SAMS的磷酸化修饰水平反应AMPK的激酶活性。结果 本研究利用大肠杆菌表达系统成功得到有激酶活性的AMPK蛋白复合体，建立了ELISA检测AMPK蛋白激酶活性的方法。通过对AMPK激活剂A-769662检测，证明该方法可以用于AMPK激活剂/抑制剂的筛选。结论 通过构建大肠杆菌共表达系统，成功获得了AMPK激酶，与传统方法相比更为简洁高效；建立的AMPK的激酶活性检测方法操作简单、准确度高且安全高效，有望用于海洋活性分子的大规模筛选，加快我国“蓝色药库”的开发。
      2022  Vol.  41(2):    43-48    [摘要](362)    [PDF](150)
    • 3-(1H-咪唑-5-基亚甲基)哌嗪-2,5-二酮类化合物的合成
      吴广鑫,张帅,刘万冬,万升标
      目的 海洋微生物中存在着多种具有药用价值的3-（1H-咪唑-5-基亚甲基）哌嗪-2,5-二酮类生物碱。本文的目的是通过化学方法合成3类含有咪唑的二酮基哌嗪生物碱（penilloid A、JBIR-74、JBIR75）。方法 以氨基酸衍生物为起始原料，经缩合、脱保护、环化、乙酰化、羟醛缩合和去乙酰化等反应合成目标化合物。结果 合成了6个含有咪唑基的二酮哌嗪类化合物，包括天然产物penilloid A、JBIR-74、JBIR-75。其中penilloid A和JBIR-74为首次合成。本工作为二酮哌嗪类化合物的化学合成方法提供了新的思路和方法。
      2022  Vol.  41(2):    49-54    [摘要](398)    [PDF](124)
    • 聚古罗糖醛酸硫酸酯-铜纳米胶束制备及抗肿瘤活性研究
      王定福,仇晓雷,郝丽桦,范子瑞,王世欣,李春霞
      目的 制备一种基于化学动力学疗法的聚古罗糖醛酸硫酸酯(PGS)-铜纳米胶束,进行抗肿瘤活性研究。方法 采用聚离子复合法,将PGS与铜离子及过氧化氢反应制备聚电解质纳米胶束PGS-Cu,分光光度法测定铜离子含量和羟基自由基,CCK-8法测定细胞活力。结果 制备的PGS-Cu纳米粒径为109.54±14.29 nm,分布系数为0.23±0.02,Zeta电位为-47.58±1.71 mV。酸性环境下,PGS-Cu纳米胶束铜离子累积释放量显著高于中性环境,并产生.OH。100 μg.mL-1的PGS-Cu纳米胶束作用下,人源三阴性乳腺癌细胞(MDA-MB-231)、小鼠乳腺癌细胞(4T1)和小鼠正常成纤维细胞(NIH/3T3)的活力分别为14.87%,62.24%和90.77%,表明PGS-Cu纳米胶束对乳腺癌细胞有显著的细胞毒性,且对MDA-MB-231细胞抑制效果最佳。此外,4T1细胞在pH 7.4和6.0时的活力分别为62.24%和18.33%,说明该纳米胶束具有pH响应性。结论成功构建了一种基于化学动力学疗法、以多糖为载体的聚电解纳米胶束,该纳米胶束具有pH响应性和肿瘤靶向性,能有效抑制乳腺癌细胞生长,发挥抗肿瘤活性。
      2022  Vol.  41(2):    55-61    [摘要](344)    [PDF](134)
    • 蛤蜊肽对去卵巢骨质疏松大鼠的改善作用
      张伦瑜，王尚龙，蔡钦岭，曹廷峰，于佳，魏玉西
      目的 探讨纳豆芽孢杆菌发酵菲律宾蛤仔制备的生物活性肽（RBPs）对去卵巢大鼠(OVX)骨质疏松症的改善作用，为我国丰富的贝类资源的高值化利用提供依据。方法 用RBPs改善去卵巢骨质疏松症大鼠5周后，检测血清中碱性磷酸酶（ALP）、25-羟基维生素D(25(OH)D)的含量，利用Micro-CT、HE染色分析骨密度、骨微结构改变情况，并进一步探究RBPs对破骨和成骨通路的调控作用。结果 RBPs使OVX大鼠的血清ALP含量显著降低，25(OH)D含量升高，骨密度(BMD)、骨钙含量和骨微结构均有明显改善。在分子机制上，我们发现RBPs可以通过抑制RANKL/RANK/OPG信号通路减少骨吸收，并激活Wnt/β-catenin通路促进骨形成。结论 RBPs对绝经后的骨质疏松症具有良好的改善作用，为RBPs作为一种改善绝经后骨质疏松症的海洋药物来源提供了依据。
      2022  Vol.  41(2):    62-70    [摘要](326)    [PDF](114)
    • 仿刺参糖胺聚糖对肺结核和肺癌患者免疫调节功能研究
      于丁一,朱敬森,肖宝红,丁海升,林存智
      目的 探讨仿刺参糖胺聚糖(HGAG)对肺结核和肺癌患者免疫调节功能影响。方法 选取健康人群40名（健康组），肺结核患者30例（结核组）和肺癌患者30例（肺癌组），取抗凝外周血4 mL，采用Ficoll密度梯度离心法分离PBMC，体外与不同浓度HGAG共培养24 h。运用流式细胞仪检测CD2、CD28和B7分子的表达。结果 健康组CD2、CD28和B7-2表达在10μg·mL-1最明显，而B7-1以50μg·mL-1最明显，与对照组比较均具有差异性（P<0.05）；肺结核组CD2、CD28和B7-1表达在50μg·mL-1最明显，B7-2以10μg·mL-1表达最明显，与对照组比较均具有差异性（P<0.05）；肺癌组CD2、CD28，B7（B7-1和B7-2）在100μg·mL-1时表达最明显，与对照组比较均具有差异性（P<0.05）。结论 HGAG在一定浓度范围内可以不同程度促进CD2、CD28和B7分子表达，体外调节肺结核和肺癌患者的细胞免疫功能。
      2022  Vol.  41(2):    71-75    [摘要](328)    [PDF](117)
      • 综述
    • 糖尿病肾病氧化应激机制与海洋药物干预治疗研究进展
      柳凡,孙延龙,玄露露,刘潇潇,王荣申,李万忠
      糖尿病肾病（DN）是糖尿病最为严重的并发症之一，也是终末期肾病的重要病因，氧化应激是DN发生发展、肾功能损伤的主要致病机制。查阅国内外相关文献，从氧化应激机制和海洋药物干预治疗两个角度进行归纳总结，综述了多元醇、AGEs、PKC、己糖胺通路，NOX、Nrf2/HO-1、AMPK因子，SGLT2、HIF-1α、肠道菌群靶点和炎症、纤维化病理损伤。实验和临床研究表明复方、多糖、小分子等海洋药物对DN具有较好的防治作用，属中医药治疗思路和方法，具有多靶点和整体调节的优势。详细阐述海洋药物防治DN药效物质基础和作用机制可为海洋药用成分的开发应用提供新的研究思路。
      2022  Vol.  41(2):    76-84    [摘要](411)    [PDF](128)
    • 水母毒素与水母蜇伤
      李捷,姜建芳,王倩倩,张黎明
      水母蜇伤是最常见的海洋生物伤,其发生率随着人们与海洋环境的密切接触不断上升。水母形态结构虽然简单,但其毒素组成复杂,可造成机体多个系统不同程度的损伤,因此水母蜇伤后临床症状较为复杂,目前尚没有基于毒素作用机制的特效抗毒药物。本文从水母毒素、水母蜇伤症状以及蜇伤后综合治疗三个方面进行综述,着重阐述近年来水母毒素组分研究的新进展以及针对毒素组分的拮抗药物的研究动态。
      2022  Vol.  41(2):    85-94    [摘要](398)    [PDF](140)

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